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टिकाऊ पशु उत्पादन सुनिश्चित करने के लिए मवेशियों में बेहतर नाइट्रोजन उपयोग महत्वपूर्ण है।चूंकि प्यूरीन और पाइरीमिडीन (पीपी) रूमेन नाइट्रोजन का एक महत्वपूर्ण हिस्सा हैं, इसलिए पीपी के अवशोषण और मध्यस्थ चयापचय की बेहतर समझ आवश्यक है।वर्तमान कार्य में 20 प्यूरीन (एडेनिन, ग्वानिन, ग्वानोसिन, इनोसिन, 2'-डीऑक्सीगुआनोसिन, 2'-डीऑक्सीनोसिन, ज़ेन्थाइन, हाइपोक्सैन्थिन), पाइरीमिडीन (साइटोसिन, थाइमिन) के एक साथ निर्धारण के लिए एक संवेदनशील और विशिष्ट विधि के विकास और सत्यापन का वर्णन किया गया है। डेयरी गायों के रक्त प्लाज्मा में यूरैसिल, साइटिडीन, यूरिडीन, थाइमिडीन, 2'-डीऑक्सीयूरिडीन), और उनके क्षरण उत्पाद (यूरिक एसिड, एलांटोइन, β-अलैनिन, β-यूरिडोप्रोपियोनिक एसिड, β-एमिनोइसोब्यूट्रिक एसिड)।इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस/एमएस) से जुड़ी उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी-आधारित तकनीक को व्यक्तिगत मैट्रिक्स-मिलान अंशांकन मानकों और स्थिर आइसोटोपिक रूप से लेबल किए गए संदर्भ यौगिकों के साथ जोड़ा गया था।मात्रात्मक विश्लेषण से पहले इथेनॉल वर्षा, निस्पंदन, वाष्पीकरण और पुनर्गठन से युक्त एक नई पूर्व-उपचार प्रक्रिया शुरू की गई थी।एलसी-एमएस/एमएस विश्लेषण के दौरान पृथक्करण और पता लगाने के मापदंडों की जांच की गई।यह पुष्टि की गई कि रैखिक अंशांकन मॉडल के बजाय लॉग-अंशांकन मॉडल का उपयोग करने से सीवी% कम हुआ और फिट परीक्षण की कमी ने एक संतोषजनक रैखिक प्रतिगमन का प्रदर्शन किया।विधि वास्तविक नमूनों के अनुसार प्रत्येक मेटाबोलाइट के लिए एकाग्रता रेंज को कवर करती है, उदाहरण के लिए गुआनिन: 0.10-5.0 μmol/L, और एलांटोइन: 120-500 μmol/L।चुनी गई परिमाणीकरण श्रेणियों के लिए सीवी% 25% से कम था।विधि में अच्छी पुनरावृत्ति (सीवी%≤25%) और मध्यवर्ती परिशुद्धता (सीवी%≤25%) और उत्कृष्ट पुनर्प्राप्ति (91-107%) है।सभी मेटाबोलाइट्स ने अच्छी दीर्घकालिक स्थिरता और रनों के भीतर अच्छी स्थिरता (सीवी%≤10%) का प्रदर्शन किया।प्लाज्मा, मूत्र और दूध में निरपेक्ष मैट्रिक्स प्रभाव की विभिन्न डिग्री देखी गईं।सापेक्ष मैट्रिक्स प्रभावों के निर्धारण से पता चला कि यह विधि धमनी और पोर्टल हेपेटिक, हेपेटिक और गैस्ट्रोस्प्लेनिक नसों से खींचे गए प्लाज्मा में लगभग सभी जांच किए गए पीपी मेटाबोलाइट्स के लिए उपयुक्त थी और, कुछ अपवादों के साथ, चिकन, सुअर जैसी अन्य प्रजातियों के लिए भी उपयुक्त थी। मिंक, इंसान और चूहा।