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केमीफ्लोरेसेंस: आणविक ल्यूमिनोल एक रासायनिक रूप से फ्लोरोसेंट अणु है जिसे हाइड्रोजन पेरोक्साइड अणुओं की उपस्थिति में उत्तेजित अवस्था एमिनोफथैलिक एसिड में परिवर्तित किया जा सकता है, जो मजबूत फ्लोरोसेंस उत्सर्जित करता है।हाइड्रोजन पेरोक्साइड कई बायोऑक्सीडेटिव प्रतिक्रियाओं का उत्पाद है, इसलिए ल्यूमिनोल को पेश करके इन बायोऑक्सीडेटिव प्रतिक्रियाओं को फोटोडिटेक्शन से जोड़ना आसान है।उदाहरण के लिए, ग्लूकोज ऑक्सीडेज/कैटालेज़ जांच नमूने में हाइड्रोजन पेरोक्साइड या ग्लूकोज की सांद्रता का पता लगा सकती है, और प्रतिक्रिया समय केवल 0.5s (गतिशील विधि) है।कैमिल्यूमिनसेंट पदार्थों को प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के साथ संयोजित करना, और प्रकाश प्रतिक्रियाओं द्वारा पता लगाए गए प्रतिरक्षा घटकों की एकाग्रता को व्यक्त करना, कैमिल्यूमिनसेंट इम्यूनोएसे तकनीक कहलाती है।1976 में, श्मेडर ने ल्यूमिनोल-एच202 और इसके व्युत्पन्न एबीईआई का पता लगाने की प्रतिक्रिया प्रदर्शन प्रणाली के रूप में उपयोग करते हुए, केमिलुमिनेसेंस इम्यूनोएसे का प्रस्ताव रखा।वर्तमान में, ल्यूमिनोल और इसके डेरिवेटिव केमिलुमिनेसेंस इम्यूनोएसे अनुप्रयोगों में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले मार्कर हैं।क्षारीय परिस्थितियों में, माइक्रोपेरोक्सीडेज द्वारा उत्प्रेरित होकर, बड़ी संख्या में फोटॉन जारी किए जा सकते हैं।ल्यूमिनोल का उपयोग एचआरपी-लेबल एंटीबॉडी के वेस्टर्नब्लॉट और एचआरपी-लेबल जांच के न्यूक्लिक एसिड संकरण का पता लगाने के लिए किया जा सकता है।इसका उपयोग आधुनिक आपराधिक जासूस खून के धब्बे का पता लगाने में भी किया जाता है।एक यौगिक जिसे केमिलुमिनसेंट मार्कर के रूप में उपयोग किया जा सकता है, उसे निम्नलिखित शर्तों को पूरा करना होगा: ल्यूमिनसेंस की क्वांटम उपज अधिक है;इसके भौतिक रासायनिक गुण अध्ययनाधीन प्रणाली से मेल खाते हैं;इसकी ल्यूमिनेसेंट प्रतिक्रिया ल्यूमिनेसेंट पदार्थ की ऑक्सीकरण प्रतिक्रिया का परिणाम है;उपयोग की जाने वाली सांद्रता सीमा के भीतर जीवित जीवों के लिए आंतरिक रूप से गैर विषैला होता है।आमतौर पर कई प्रकार के केमिलुमिनसेंस अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है: एक्रिडीन एस्टर, एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला केमिलुमिनसेंस ट्रेसर, यह एक ट्राइसाइक्लिक कार्बनिक यौगिक है, ऑक्सीकरण करना आसान है, और ऑक्सीकरण प्रतिक्रिया के लिए उत्प्रेरक की आवश्यकता नहीं होती है, और 430nm पर फोटॉन जारी करता है;ल्यूमिनॉल और आइसोलुमिनॉल और उनके डेरिवेटिव सबसे परिपक्व केमिलुमिनसेंट एजेंट हैं।1964 की शुरुआत में, जब केमिलुमिनसेंस पर रिपोर्ट दी गई थी, तब केमिलुमिनसेंस के लिए ल्यूमिनोल, आइसोलुमिनोल और उनके डेरिवेटिव का उपयोग किया गया था।इम्यूनोपरख ने बेहतर परिणाम प्राप्त किए हैं।ल्यूमिनसेंस का पता लगाना: इष्टतम प्रतिदीप्ति तरंग दैर्ध्य 400nm है (60mmK2S2O8, 100mmK2CO3, pH11.5 समाधान में केमिलुमिनसेंस का पता लगाना)

केमिलुमिनसेंस: एक संवेदनशील परख विधि के रूप में, केमिलुमिनसेंस का व्यापक रूप से एंजाइमों, कोशिकाओं और जैविक जीवों में उत्पादित मुक्त कणों और प्रतिक्रिया मेटाबोलाइट्स का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।उनके ऑक्सीकरण उत्पादों और मेटाबोलाइट्स द्वारा उत्सर्जित प्रकाश का उपयोग विभिन्न फोटोमीटर के साथ किया जा सकता है।पता लगाना.इसकी संवेदनशीलता, तीव्रता, सरल संचालन और कम कीमत के कारण पॉलीफेनोल्स, पॉलीसेकेराइड्स, फ्लेवोनोइड्स और एन्थ्राक्विनोन जैसे एंटीऑक्सिडेंट की स्क्रीनिंग और अनुसंधान में केमिलुमिनसेंस का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।सुपरऑक्साइड आयनों के निर्धारण के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली केमिलुमिनेसेंस प्रणालियों में ज़ैंथिन ऑक्सीडेज-ल्यूमिनोल, पाइरोगैलोल-ल्यूमिनोल और डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड-ल्यूमिनोल शामिल हैं।पहला एक एंजाइमेटिक प्रणाली है, और बाद वाला दो यह एक गैर-एंजाइमी सिस्टम है।हाइड्रॉक्सिल रेडिकल्स के निर्धारण के लिए केमिलुमिनसेंस सिस्टम में मुख्य रूप से कॉपर सल्फेट-यीस्ट (या अस्थि मज्जा कोशिकाएं) - एस्कॉर्बिक एसिड-हाइड्रोजन पेरोक्साइड, CuCl-H2O2-o-फेनेंथ्रोलाइन-कार्बोनेट बफर, कॉपर सल्फेट-ओ-फेनेंथ्रोलाइन-एस्कॉर्बिक एसिड-हाइड्रोजन शामिल हैं। पेरोक्साइड 5 केमिलुमिनेसेंस सिस्टम, फेरस सल्फेट-ल्यूमिनोल-हाइड्रोजन पेरोक्साइड और फेरस सल्फेट-ल्यूमिनोल, सभी में हाइड्रॉक्सिल रेडिकल उत्पन्न करने के लिए क्लासिक फेंटन प्रतिक्रिया शामिल होती है, और फिर केमिलुमिनसेंस उत्पन्न करने के लिए ल्यूमिनसेंट एजेंट पर हमला किया जाता है, जिसका उपयोग अर्क को हटाने के लिए किया जा सकता है। प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन रेडिकल्स की गतिविधि।प्रायोगिक विधि: पाइरोगैलोल-ल्यूमिनोल केमिलुमिनसेंस सिस्टम का उपयोग करें: ल्यूमिनोल को 0.05mol/L NaOH घोल के साथ 0.05mol/L सांद्रण घोल में बनाया जाता है, एक अंधेरी जगह में संग्रहित किया जाता है, और उपयोग से पहले डबल आसुत जल में 1mmol/L घोल में पतला किया जाता है, 1mmol/का उपयोग किया जाता है। एल एचसीएल पाइरोगैलोल का 0.01मोल/लीटर घोल बनाने के लिए, इसे रेफ्रिजरेटर में 4°C पर संग्रहित करें, और उपयोग से पहले इसे डबल आसुत जल से 16 गुना 6.25×10-4मोल/लीटर घोल में पतला करें।उपयोग से पहले 0.05mol/L pH10.2Na2CO3-NaHCO3 बफर (0.1mmol/LEDTA युक्त) तैयार किया गया था, और प्रयोग मिश्रण से पहले ल्यूमिनॉल और कार्बोनेट बफर बनाने के लिए 2:1 (वॉल्यूम अंश) पर 1mmol/L ल्यूमिनॉल के साथ मिलाया गया था।माप के दौरान, विभिन्न सांद्रता (0, 0.08, 0.4, 2 और 10 मिलीग्राम/एमएल) के 10.0 μL नमूनों को ल्यूमिनसेंट सेल में इंजेक्ट करें (नियंत्रण के रूप में नमूना बफर के साथ), और फिर 6.25×10-4mol/L पाइरोगॉलोल इंजेक्ट करें 0.05 अंत में, प्रतिक्रिया (30 डिग्री सेल्सियस) शुरू करने के लिए ल्यूमिनॉल और कार्बोनिक एसिड बफर के मिश्रण का 0.94 एमएल जोड़ा गया, ल्यूमिनसेंस की तीव्रता को 2 एस के अंतराल पर गिना गया, और 300 एस पर कुल एकीकृत ल्यूमिनसेंस तीव्रता को मापा गया।जब पायरोगॉलोल नहीं मिलाया गया था तो पृष्ठभूमि ल्यूमिनेसेंस की तीव्रता ल्यूमिनेसेंस थी।कीमत।इसके अलावा, प्रतिदीप्ति केमिलुमिनेसेंस आदि के निर्धारण के लिए केमिलुमिनसेंस, प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी और एनबीएस-डाइक्लोरोफ्लोरेसिन केमिलुमिनसेंस प्रणाली हैं, उनका सबसे बड़ा लाभ उच्च संवेदनशीलता है।

रासायनिक गुण: पीला क्रिस्टलीय पाउडर.लाइ में आसानी से घुलनशील, तनु एसिड में घुलनशील, पानी में लगभग अघुलनशील और अल्कोहल में अघुलनशील।तटस्थ या थोड़ा अम्लीय समाधान पराबैंगनी प्रकाश के संपर्क में आने पर मजबूत चमकदार नीली प्रतिदीप्ति प्रदर्शित करते हैं।गलनांक 329-332℃

उपयोग: रासायनिक विश्लेषण अभिकर्मक और संकेतक के रूप में।केमिलुमिनसेंस विश्लेषण पहचान अभिकर्मक का उपयोग करें (जैसे धातु धनायन या रक्त का निर्धारण)

उपयोग: केमिलुमिनसेंस विश्लेषण के लिए, जैसे: धातु धनायन, रक्त और ग्लुकोकोर्टिकोइड्स

उपयोग: ल्यूमिनसेंस परीक्षण: Emmax440nm (केमिलुमिनसेंस; 60mmK2S2O8, 100mmK2CO3, pH11.5; H2O2 जोड़ने के बाद) केमिल्यूमिनसेंस अभिकर्मक और संकेतक, आमतौर पर केमिलिनेसेंस विश्लेषण में उपयोग किया जाता है, जैसे धातु धनायन, रक्त प्रतिरक्षा, आदि।