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हालाँकि इंटरवर्टेब्रल डिस्क डिजनरेशन के एटियलजि को कम समझा गया है, इस प्रक्रिया को रोकने का एक तरीका एपोप्टोसिस को रोकना हो सकता है।वर्तमान अध्ययन में, डिस्क सेल अस्तित्व को बढ़ाने के उद्देश्य से न्यूक्लियस पल्पोसस (एनपी) कोशिकाओं में कार्बोक्सिमिथाइलेटेड चिटोसन (सीएमसीएस) के एंटी-एपोप्टोटिक प्रभावों की जांच की गई।चूहा एनपी कोशिकाओं को अलग किया गया और इन विट्रो में संवर्धित किया गया, और एनपी सेल एपोप्टोसिस मॉडल बनाने के लिए हाइड्रोजन पेरोक्साइड (H2O2) का उपयोग किया गया।सेल व्यवहार्यता का आकलन सेल काउंटिंग किट-8 परख के साथ किया गया था।एपोप्टोटिक कोशिकाओं के अनुपात का सर्वेक्षण एनेक्सिन वी-फ्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट (एफआईटीसी) और प्रोपिडियम आयोडाइड (पीआई) डबल स्टेनिंग विश्लेषण द्वारा किया गया था, और आकृति विज्ञान को होचस्ट 33342 स्टेनिंग द्वारा देखा गया था।एनपी कोशिकाओं की माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता का मूल्यांकन रोडामाइन 123 प्रतिदीप्ति धुंधला द्वारा किया गया था।इंड्यूसिबल नाइट्रिक ऑक्साइड सिंथेज़ (आईएनओएस), कैस्पेज़-3, बी-सेल लिंफोमा (बीसीएल)-2, टाइप II कोलेजन और एग्रेकेन के एमआरएनए स्तर को मापने के लिए रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन (आरटी)-क्वांटिटेटिव पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (क्यूपीसीआर) किया गया था।iNOS और Bcl-2 के प्रोटीन स्तर का पता लगाने के लिए वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण किया गया।एनेक्सिन वी-एफआईटीसी/पीआई और होचस्ट 33342 धुंधला परिणामों ने संकेत दिया कि सीएमसीएस खुराक पर निर्भर तरीके से एनपी कोशिकाओं को एपोप्टोसिस से रोकने में सक्षम था।रोडामाइन 123 स्टेनिंग ने स्पष्ट किया कि सीएमसीएस ने एच2ओ2-उपचारित एनपी कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता की हानि को कम कर दिया है।आरटी-क्यूपीसीआर और वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण द्वारा सीएमसीएस-उपचारित एनपी कोशिकाओं में कम कैस्पेज़-3 और बढ़ी हुई बीसीएल-2 गतिविधि का पता लगाया गया।सीएमसीएस ने H2O2-उपचारित एनपी कोशिकाओं में टाइप II कोलेजन और एग्रेकेन के प्रसार और स्राव को भी बढ़ावा दिया।डिस्क अध: पतन को विनियमित करने में इस चिकित्सीय दृष्टिकोण के संभावित लाभों को प्रदर्शित करते हुए, सीएमसीएस को इन विट्रो में एपोप्टोटिक कोशिका मृत्यु को रोकने में प्रभावी होने का संकेत दिया गया था।