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सिस्टीन (Cys) यूकेरियोटिक कोशिकाओं की कई शारीरिक प्रक्रियाओं में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है और कोशिकाओं में इसका पता लगाना मौलिक महत्व का है।हालाँकि, ग्लूटाथियोन (जीएसएच), होमोसिस्टीन, एन-एसिटाइल-एल-सिस्टीन और अन्य थिओल्स सीआईएस का पता लगाने में काफी बाधा डालते हैं।विशेष रूप से, जीएसएच अपनी उच्च इंट्रासेल्युलर सांद्रता (1-10 मिमी) के कारण सेलुलर सीआईएस (30-200 μM) का पता लगाने में दृढ़ता से हस्तक्षेप करता है।इस कार्य में, Cys का पता लगाने के लिए एक ऑफ-ऑन फ्लोरोसेंट जांच (HOTA) प्रस्तुत की गई है।इस जांच में सेलुलर Cys का पता लगाने के लिए उत्कृष्ट संवेदनशीलता और संतोषजनक चयनात्मकता दोनों हैं: 200 μM Cys के अतिरिक्त, जांच की प्रतिदीप्ति तीव्रता (10 μM) 117 गुना बढ़ गई और पता लगाने की सीमा 13.47 μM आंकी गई, जो कि कम है सेलुलर Cys एकाग्रता की तुलना में;जांच में 1-10 एमएम ग्लूटाथियोन की तुलना में 30-200 μM सिस्टीन का भी चयनात्मक रूप से पता लगाया गया।नतीजतन, सेल इमेजिंग प्रयोग HOTA जांच के साथ किए गए।इसके अलावा, थियोल-ब्लॉकिंग और जीएसएच संश्लेषण अवरोधक प्रयोगों के परिणामों ने पुष्टि की कि इंट्रासेल्युलर उत्सर्जन मुख्य रूप से सीआईएस और एचओटीए के बीच बातचीत से उत्पन्न होता है।