उत्पादों

फ़्लोरेसिन और फ़्लोरेसिन मिथाइल एस्टर के मोनोग्लैक्टोपाइरानोसाइड्स: बायोटनीलेटेड β-गैलेक्टोसिडेज़ द्वारा संश्लेषण, एंजाइमैटिक हाइड्रोलिसिस, और ट्रांसलेशनल प्रसार गुणांक का निर्धारण

फ्लोरेसिन मोनोग्लाइकोसाइड्स (डी-गैलेक्टोपाइरानोसाइड (एफएमजी) और डी-ग्लूकोपाइरानोसाइड) और उनके मिथाइल एस्टर (एमएफएमजी) को अच्छी पैदावार वाले एसिटोब्रोमोग्लूकोज/गैलेक्टोज और फ्लोरेसिन मिथाइल एस्टर से तैयार किया गया है।गैलेक्टो डेरिवेटिव के एंजाइमैटिक हाइड्रोलिसिस प्रयोग (बायोटिनाइलेटेड β-गैलेक्टोसिडेज़ का उपयोग करके) किए गए हैं और गतिज मापदंडों की गणना की गई है।हाइड्रोलिसिस के दौरान प्रतिदीप्ति तीव्रता में 15-20 गुना वृद्धि देखी गई है।कम समय और सब्सट्रेट की कम सांद्रता पर प्रतिदीप्ति की एक रैखिक वृद्धि देखी गई है, जिससे ये यौगिक गैलेक्टोसिडेस के लिए उपयोगी और संवेदनशील जांच बन गए हैं।एमएफएमजी के लिए माइकलिस-मेंटेन स्थिरांक (किमी) मान का परिमाण एफएमजी की तुलना में अधिक है जो फ्लोरोजेनिक सब्सट्रेट के संभावित गठनात्मक परिवर्तन का सुझाव देता है।एफएमजी के साथ बायोटिनाइलेटेड β-गैल के लिए किमी मान मूल एंजाइम की तुलना में कम है।यह अवलोकन देशी एंजाइम की तुलना में बायोटिनाइलेटेड एंजाइम की उच्च सब्सट्रेट आत्मीयता को इंगित करता है।फ्लोरोसेंस सहसंबंध स्पेक्ट्रोस्कोपी का उपयोग करके, फ्लोरोजेनिक सब्सट्रेट्स और दोनों उत्पादों के लिए ट्रांसलेशनल प्रसार गुणांक मापा गया है।फ्लोरोजेनिक सब्सट्रेट्स और एंजाइमेटिक हाइड्रोलिसिस उत्पादों के लिए ट्रांसलेशनल प्रसार गुणांक को 3.5-4.5 × 10−10 m2 s−1 की सीमा में समान मापा गया है।इस प्रकार सब्सट्रेट और उत्पाद की ट्रांसलेशनल गतिशीलता में अंतर के कारण एंजाइमैटिक कैनेटीक्स में वृद्धि या मंदता उतनी स्पष्ट नहीं है।