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मानव आंत सहजीवन में अल्फा-मैनोसिडेस के Ca2+-आश्रित परिवार में यंत्रवत अंतर्दृष्टि।

कोलोनिक बैक्टीरिया, जिसका उदाहरण बैक्टेरॉइड्स थेटायोटाओमाइक्रोन है, आहार पॉलीसेकेराइड का शोषण करने और पोषक तत्वों के रूप में ग्लाइकन्स की मेजबानी करने के लिए ग्लाइकोसाइड हाइड्रॉलिसिस (जीएच) के बड़े परिवारों का उपयोग करके मानव स्वास्थ्य को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।इस तरह के GH परिवार के विस्तार का उदाहरण बी. थेटायोटाओमाइक्रोन जीनोम द्वारा एन्कोड किए गए 23 परिवार GH92 ग्लाइकोसिडेस द्वारा दिया गया है।यहां हम दिखाते हैं कि ये अल्फा-मैनोसिडेस हैं जो मेजबान एन-ग्लाइकेन्स का उपयोग करने के लिए एकल विस्थापन तंत्र के माध्यम से कार्य करते हैं।दो GH92 मैनोसिडेस की त्रि-आयामी संरचना दो-डोमेन प्रोटीन के एक परिवार को परिभाषित करती है जिसमें उत्प्रेरक केंद्र डोमेन इंटरफ़ेस पर स्थित होता है, जो Ca(2+) में हाइड्रोलिसिस के लिए एसिड (ग्लूटामेट) और बेस (एस्पार्टेट) सहायता प्रदान करता है। आश्रित ढंग.अवरोधकों के साथ जटिल GH92s की त्रि-आयामी संरचनाएं उत्प्रेरण की विशिष्टता, तंत्र और गठनात्मक यात्रा कार्यक्रम में अंतर्दृष्टि प्रदान करती हैं।सीए(2+) मैनोसाइड को उसकी जमीनी अवस्था (4)सी(1) चेयर संरचना से दूर संक्रमण अवस्था की ओर विकृत करने में मदद करने में एक महत्वपूर्ण उत्प्रेरक भूमिका निभाता है।（ग्रंथ सूची: नेट।रसायन.बायोल.6, 125-32, (2010）

कॉन्केनवेलिन ए-सेफ़रोज़ कॉलम पर ओवलब्यूमिन ग्लाइकोस्पैरागिन्स की फ्रंटल एफ़िनिटी क्रोमैटोग्राफी।लेक्टिन की बाइंडिंग विशिष्टता का एक मात्रात्मक अध्ययन।

ओवलब्यूमिन से प्राप्त 10 ग्लाइकोस्पैरागिन के साथ सेफ़रोज़ 4बी-इमोबिलाइज़्ड कॉन्केनवेलिन ए (कॉनए) की इंटरैक्शन की फ्रंटल एफ़िनिटी क्रोमैटोग्राफी द्वारा मात्रात्मक रूप से जांच की गई थी।इस विधि में, एक कार्बोहाइड्रेट समाधान को कॉनए-सेफ़रोज़ कॉलम पर लगातार लागू किया जाता है और रेफरेंस फ्रंट की मंदता को इंटरैक्शन की ताकत के एक पैरामीटर के रूप में मापा जाता है।ConA के साथ प्रत्येक सैकेराइड के लिए पृथक्करण स्थिरांक (Kd) निर्धारित किया जा सकता है।पी-नाइट्रोफेनिल-अल्फा, डी-मैनोसाइड के बाइंडिंग के विश्लेषण से पता चला है कि कॉनए के बाइंडिंग गुण सेफ़रोज़ 4बी पर स्थिरीकरण के बाद अनिवार्य रूप से नहीं बदलते हैं।विश्लेषण के लिए रिडक्टिव मिथाइलेशन विधि द्वारा प्रत्येक ओवलब्यूमिन ग्लाइकोस्पैरागिन को ट्रिटियम के साथ लेबल किया गया था।प्राप्त केडी मूल्यों की तुलना से पता चला कि ग्लाइकोसिल श्रृंखला के बहुत मामूली संरचनात्मक अंतर के साथ कॉनए का बंधन काफी भिन्न होता है।नतीजे बताते हैं कि कॉनए एक विशिष्ट ग्लाइकोसिल श्रृंखला संरचना, मैन अल्फा 1-6 (मैन अल्फा 1-3) मैन को पहचानता है, जिसमें सी-6-लिंक्ड मैनोज की सी-3 स्थिति में कम से कम एक हाइड्रॉक्सिल समूह मुक्त होना चाहिए।